揭秘精密系統(tǒng)
生物組織是多類細(xì)胞中數(shù)千種蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)果,這些蛋白質(zhì)共同保障組織運(yùn)行正常。多標(biāo)免疫熒光成像是一種新型技術(shù),能清晰地可視化、識(shí)別、量化多種生物標(biāo)志物及其在微環(huán)境中的分布情況,以便用戶獲取更清晰的目標(biāo)組織圖像(包括多類細(xì)胞及其環(huán)境)。
為便于您了解多標(biāo)組織成像,我們整理了一些術(shù)語供您參考。
圖1:胰腺癌的多標(biāo)組織成像分析整體解決方案顯示六輪四種生物標(biāo)志物。右側(cè)為最終的多標(biāo)組織成像,共顯示了24個(gè)生物標(biāo)志物。
圖2:用Cell DIVE成像的胰腺癌組織切片,顯示4種生物標(biāo)志物:SMAC、PCAD、ATP101和LDHA。
自發(fā)熒光
生物樣本自然發(fā)射的光。自發(fā)熒光會(huì)干擾生物標(biāo)志物成像,將其去除可以提高生物標(biāo)志物的信噪(自發(fā)熒光)比。去除自發(fā)熒光后,分析時(shí)只需考慮真正的陽性生物標(biāo)志物即可。
生物標(biāo)志物
一種用于指示生物來源、特定器官的存在情況,或生理?xiàng)l件或過程;尤其可作為評(píng)判醫(yī)療狀況(易感性)的診斷指標(biāo)。
染料偶聯(lián)抗體
附著有熒光分子的多克隆或單克隆抗體,可用于可視化組織。
圖3:30種生物標(biāo)志物的表達(dá)模型。(左)生物標(biāo)志物的細(xì)胞圈選。(右)30種生物標(biāo)志物的Cell DIVE圖像。
福爾馬林固定的
石蠟包埋(FFPE)組織切片
FFPE是一種保存和制備活檢標(biāo)本的方式。將組織樣本固定在甲醛中,以保存好組織內(nèi)的蛋白質(zhì)與結(jié)構(gòu)。固定后,將組織嵌入石蠟,以便對(duì)組織切片并將其放上玻片。
免疫熒光(IF)
一種依靠抗體與其抗原相互作用的染色技術(shù)。附著熒光標(biāo)記物(熒光基團(tuán))的染料偶聯(lián)抗體與其在細(xì)胞內(nèi)的特異性生物分子靶點(diǎn)相結(jié)合,以可視化靶分子及其在樣本中的分布情況。
直接免疫熒光——使用可直接結(jié)合特定靶點(diǎn)的單一抗體。熒光基團(tuán)專門與抗體偶聯(lián)。
間接免疫熒光——使用兩種抗體。一抗與特定靶點(diǎn)結(jié)合。然后,熒光基團(tuán)偶聯(lián)的二抗與一抗結(jié)合,可用于檢測(cè)。
超多標(biāo)免疫熒光成像
一種免疫熒光技術(shù),用于可視化組織微環(huán)境中多種抗原的分布情況。使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的抗體探測(cè)FFPE組織切片,然后成像,即可去除熒光信號(hào)。接下來,再用另外的抗體重新探測(cè)組織。單個(gè)圖像被分層,生成組織的完整圖像和所有已探測(cè)抗原的定位。
多標(biāo)表型譜
每種細(xì)胞類型均表達(dá)有利于其功能的特定蛋白質(zhì)。這些單獨(dú)的生物標(biāo)志物全部可視化后,有助于鑒定組織微環(huán)境中的細(xì)胞,從而構(gòu)建整個(gè)組織表型的完整圖像。
單細(xì)胞分析
在單細(xì)胞層上研究特定生物分子的存在和定位情況。單細(xì)胞分析可用于研究群體內(nèi)的細(xì)胞間變異情況(如器官或組織內(nèi))。
空間細(xì)胞生物學(xué)/
空間生物標(biāo)志物分析
研究組織環(huán)境中的細(xì)胞??臻g細(xì)胞生物學(xué)和生物標(biāo)志物分析可用于繪制組織內(nèi)細(xì)胞及其與周圍細(xì)胞的相互作用的圖像。
組織/腫瘤微環(huán)境
組織結(jié)構(gòu)中各種細(xì)胞類型有組織的組合,通過物理、機(jī)械和生化機(jī)制影響細(xì)胞表型。全面了解腫瘤微環(huán)境有利于評(píng)估癌癥進(jìn)展情況,找出治療癌癥的新療法。
寬場(chǎng)顯微鏡
常用于多標(biāo)顯微鏡技術(shù),可將整個(gè)目標(biāo)標(biāo)本暴露在光源之下,從而對(duì)整個(gè)視場(chǎng)進(jìn)行成像。在多標(biāo)寬場(chǎng)顯微鏡中,建議使用薄標(biāo)本(單個(gè)細(xì)胞的厚度)進(jìn)行細(xì)胞表型分析。
邂逅CELL DIVE
一款改變組織研究的開放式系統(tǒng)
目前,癌癥研究人員可用的組織成像分析系統(tǒng)并不多,而Cell DIVE則是一款高精度、開放式的解決方案,能指導(dǎo)您如何設(shè)計(jì)和執(zhí)行超多標(biāo)研究。
Cell DIVE凝聚了科研人員十余年的研究成果,可以提供清晰的全組織成像。您可以利用單細(xì)胞空間繪圖效果,更好地了解組織微環(huán)境的情況。
在單細(xì)胞層級(jí)上,利用一個(gè)組織切片完成60+生物標(biāo)志物的空間繪圖
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超多標(biāo)實(shí)驗(yàn)方案